I love your channel! You have clear steps written and I understood them easily! This really helps with my cell culturing procedures thank you so so much 🤍 your editing and video recorded is so aesthetically pleasing too! keep it up 😍
thank you for the video, why do you decide to resuspent the cell pellet in 10ml media? will it affecting the calculation if i use different amount of media to suspensing the cell pellet?
I also have this question. Because in my lab I usually resuspend in 1mL, if I want to plate in larger plates and not like the 96 well plate. what determines the volume of medium to resuspend the cells after centrifugation. Also I like counting the cells just before centrifugation. Does this affect anything?
is there any simple process to know the confluency of the cells? i always get wrong in judging confluency in my lab? we donot count cells for subseeding, we just watch the confluency to be between 70-80% and then subseed it to 20%, is it right process?
Different labs have different protocols, so there are various methods. I think the reason for determining the appropriate number of cells per well and counting cells is to ensure consistency when comparing the differences in efficacy of substance treatments.
안녕하세요 계산식을 보다가 이해가 가지 않아서요 1. 9.8x10^5cells/ml:10ML=1x10^4cells/100ul:xML 따라서 xML=((1x10^4cells/100ul)/ (9.8x10^5cells/ml))x10ml이 아닌가요? 어디부분에서 잘못한건지 답은 틀리는데 어떻게 이해해야할지 모르겠습니다. 비례식을 썼는데 10ML 이 어디로 간건지.. 헷갈립니다. 그리고 뒤에 6well seeding 과정 설명에 100well 필요한 cell 이라고 적어주셨는데 7well 기준 필요한 cell 양을 잘못 적으신건지 궁금합니다.
답변이 늦어서 죄송합니다. 영상을 검토해보았는데 제가 잘못 표기한 것 같습니다. Cell suspension 10 mL 중 Live cell 1. 9.8x10^5 cells/mL 이라서 표기가 (9.8x10^5 cells/mL) x 10 이 맞습니다. 비례식을 정정하자면, (9.8x10^5 cells) x 10 : 10 mL = 100 (필요한 well 수)x (1x10^4 cells) (well 당 필요한 cell 수) : X mL (Cell suspension 10 mL 중 필요한 cell 양) 10 x 100 x 10^4 = (9.8x10^5) x 10 x X mL X mL = 10 x 100 x 10^4 / (9.8x10^5) x 10 = 1.02040816 mL 입니다 ! 혼란은 드려서 죄송합니다 ㅠㅠ
평소에 seeding을 할 때에는 아래와 같이 비례식을 축약해서 사용하는 게 편할거예요. Cell suspension 중 필요한 cell 양 (mL) = (well 당 cell 수) x (seeding 할 well 수) / (Cell suspension 중 Live cell 수) X mL = (1 x 10^4 cells) x 100 wells / 9.8x10^5 cells = 1.02040816 mL
정말 기본적인 실험과정의 일부로 생각하실분들도 많겠지만 진심으로 과정하나하나를 스스로 점검하시며 고뇌하신 흔적이 그대로 영상에 남아있는것 같아 뭉클합니다ㅜ
진심으로 응원합니다!
세상에 이런 부분까지 알아주시다니 감동인걸요 ,, ♥ !!!!!! 시청해주셔서 감사합니다 응원해주셔서 감사합니다 !!!
I love your channel! You have clear steps written and I understood them easily! This really helps with my cell culturing procedures thank you so so much 🤍 your editing and video recorded is so aesthetically pleasing too! keep it up 😍
Thank you for your comments ♥ I hope my video will be helpful for your research. Luv U !!! ,
혹시 cell harvest 하는 과정도 올려주실 수 있으실까요,,??
thank you for the video, why do you decide to resuspent the cell pellet in 10ml media? will it affecting the calculation if i use different amount of media to suspensing the cell pellet?
I also have this question. Because in my lab I usually resuspend in 1mL, if I want to plate in larger plates and not like the 96 well plate. what determines the volume of medium to resuspend the cells after centrifugation. Also I like counting the cells just before centrifugation. Does this affect anything?
교보제로 사용해도 될만큼 자세하네요 ㅋㅋㅋ 매일하는 실험을 유튜브로 보니까 신기해요 ㅋㅋㅋ
요즘 후배한테 인수인계 하는 시기인데 "내 영상 보고 공부해와 ~~!!" 이렇게 공부시켜요 ㅎㅎㅎㅎ ㅎ 영상을 만들어두니 엄청 편하더라구요 🥳
@@hyejulee7072 인수인계중이시군요 ㅋㅋㅋㅋ 저는 외국에서 연구하고있어서 외국학생들에게도 보여줘야겠어요 ㅋㅋㅋㅋ 대학생들이 실험 실습오는데 의대학생들 이니까 기본적인 피펫 사용법같은 룰같은것을 모를때가 있더라구요ㅋㅋ 말로 설명하는것 보다 한번 보는게 더좋을것 같아요
is there any simple process to know the confluency of the cells? i always get wrong in judging confluency in my lab? we donot count cells for subseeding, we just watch the confluency to be between 70-80% and then subseed it to 20%, is it right process?
Wish someone could answer this
Its kinda subjective imo
Different labs have different protocols, so there are various methods. I think the reason for determining the appropriate number of cells per well and counting cells is to ensure consistency when comparing the differences in efficacy of substance treatments.
안녕하세요
계산식을 보다가 이해가 가지 않아서요
1. 9.8x10^5cells/ml:10ML=1x10^4cells/100ul:xML
따라서 xML=((1x10^4cells/100ul)/ (9.8x10^5cells/ml))x10ml이 아닌가요?
어디부분에서 잘못한건지 답은 틀리는데 어떻게 이해해야할지 모르겠습니다.
비례식을 썼는데 10ML 이 어디로 간건지.. 헷갈립니다.
그리고 뒤에 6well seeding 과정 설명에 100well 필요한 cell 이라고 적어주셨는데 7well 기준 필요한 cell 양을 잘못 적으신건지 궁금합니다.
저도 이해안돼요 혹시 이해됬나오?
@@Apricity03 아니요 답변 기다리고 있습니다
답변이 늦어서 죄송합니다. 영상을 검토해보았는데 제가 잘못 표기한 것 같습니다.
Cell suspension 10 mL 중 Live cell 1. 9.8x10^5 cells/mL 이라서 표기가 (9.8x10^5 cells/mL) x 10 이 맞습니다.
비례식을 정정하자면,
(9.8x10^5 cells) x 10 : 10 mL = 100 (필요한 well 수)x (1x10^4 cells) (well 당 필요한 cell 수) : X mL (Cell suspension 10 mL 중 필요한 cell 양)
10 x 100 x 10^4 = (9.8x10^5) x 10 x X mL
X mL = 10 x 100 x 10^4 / (9.8x10^5) x 10 = 1.02040816 mL
입니다 ! 혼란은 드려서 죄송합니다 ㅠㅠ
평소에 seeding을 할 때에는 아래와 같이 비례식을 축약해서 사용하는 게 편할거예요.
Cell suspension 중 필요한 cell 양 (mL) = (well 당 cell 수) x (seeding 할 well 수) / (Cell suspension 중 Live cell 수)
X mL = (1 x 10^4 cells) x 100 wells / 9.8x10^5 cells = 1.02040816 mL
kudos to your effort! sharing this video with my student
원래 기기 분석을 하다가 갑자기 미생물, 셀 실험에 참여하게 되어서 걱정이 많았는데 공부에 도움이 많이 됐어요!! 너무 좋은 영상 감사합니다 ㅠㅠ
Thanks for easy explanation
Thank you so much 🙏🙏
선생님께서는 seeding용 plate와 culture용 plate를 따로 만들어서 실험하시나요? 아니면 seeding하고 남은 cell을 culture하시나요?
Culture용 dish (maintain dish) 는 고정으로 계속 Culture 를 하고 seeding이 필요한 경우에는 subculture 하고 남은 cell 을 이용하여 seeding을 하고 있습니다 !
혹시 6well할때 왜 seeding solution에 7wellsx2ml인가요! 6wellx2ml아닌가요?
pipetting하면서 loss 생길수도 있고.. 엑스트라로 조금 더 만들어줘요
저는 세포가 자꾸 중간에만 뭉쳐서 고민이였는데 한번 바닥에 놓고 저렇게 흔들어봐야겠어요 ㅎㅎ
혹시 떠서 자라는 세포도 영상으로 만들어 주실 수 있으실지요?
제가 다음에 키울 기회가 된다면 ,, 시도해보겠습니다 !!! 시청해주셔서 감사합니다 !!
Your media looks a lil alkaline.
Thank you so much!!!
amazing, thanks a lot!!!!!!❤❤❤❤
정말 감사해요 ㅠㅠ
시청해주셔서 감사합니다 ♥
thank youuuuu
🧫💚🤍🧪💚🤍